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天津本生:人ELISA試劑盒檢測結果應具備的三條件

更新時(shí)間:2023-04-07    點(diǎn)擊次數:1552

  天津本生:人ELISA試劑盒檢測結果應具備的三條件


  1、標本因素

  血清標本可按常規方法采集,應留意避免溶血,紅細胞溶解時(shí)會(huì )開(kāi)釋出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標記的ELISA測定中,溶血標本可能會(huì )增加非特異性顯色。

  如在冰箱中保留過(guò)久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。本文將敘述板式ELISA各個(gè)操縱步驟的留意要點(diǎn),珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應用,嚴格遵照劃定操縱,必能得出正確的結果。

  加樣時(shí)應將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不可濺出,不可產(chǎn)氣憤泡。有此測定需用稀的血清,可在試管中按劃定的稀釋度稀釋后再加樣.

  2、ELISA加樣步驟

  在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。凍結血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強烈振蕩。

  制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清天然凝固、血kuai收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液,再在其加入血清標本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。

  一般說(shuō)來(lái),在5天內測定的血清標本可放置于4℃,超過(guò)一周測定的需低溫冰存。可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液、分泌物和排泄物等均可作標本以測定其中某種抗體 或抗原成份,elisa試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時(shí)放回冰箱保留。

  3、固相載體

  ELISA的操縱因固相載體的形成不同而有所差異,海內醫學(xué)檢修一般均用板式點(diǎn)。除特殊情況外,在醫學(xué)檢修中均以血清作為檢測標本。

  加酶結合物應用液和底物用液時(shí)可用定量多道加液器,使加液過(guò)程迅速完成。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會(huì )產(chǎn)生假陽(yáng)性反應。每次加標本應更換吸嘴,以發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。

  良好的儀器和準確的操縱是保證ELISA試劑盒檢測結果正確可靠的必要條件。ELISA頂用的蒸餾 水或去離子水,包括用于洗滌的,應為新鮮的和高質(zhì)量的。有些標本可直接進(jìn)行測定,有些則需經(jīng)預處理。

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